检测血液中冰毒及其相关化学物质

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所属分类:毒检试纸知识
摘要

通过这种新型快速的检测技术,检测血液中是否含有冰毒、摇头丸等相关化学物质。

检测血液中冰毒及其相关化学物质

为实现对冰毒、摇头丸等苯丙胺类滥用药物准确的监控,研究者们做了大量的分析研究,如液液萃取、固相萃取法、微波萃取等常见的前处理方法与各种色谱质谱分析方法相结合进行分析。血液中含有大量的有机物在仪器分析中常常会出现基质干扰,影响目标物的分析。对于复杂基质中的基质效应问题,前处理方法往往是减弱基质效应的最常用方法。

对于新兴的QuEChERS方法,不同的学者们将其将应用于食品、环境等多领域中复杂基质的农药残留分析,但是对于法医毒物分析,目前国内研究尚少,仅有对血液、尿液中有限几种毒药物的报道,如安眠类药物巴比妥、苯二氮卓类。对于当下非常流行的苯丙胺类滥用药物,仅发现吕等对腐败血中甲卡西酮和卡西酮等药物的研究报道。

本研究旨在通过优化QuEChERS方法,建立微型QuEChERS方法用于血液样本的前处理,结合超高效液相色谱串联质谱法(UPLC-MS/MS),建立一种同时测定血液中苯丙胺(Amphetamine)、甲基苯丙胺(Methamphetamine)、MDA(3,4-亚甲基二氧基苯丙胺)、MDMA(3,4-亚甲基二氧基甲基苯丙胺)、MDEA(N-乙基-3,4-亚甲基二氧基苯丙胺))、PMMA(对甲氧基甲基苯丙胺)、N-异丙基苄胺(N-Isopropylbenzylamine)、麻黄碱(Ephedrine)、司来吉兰(Selegiline)等9种苯丙胺类相关物质的分析方法,为法庭科学机构提供一定的实验依据。

苯丙胺、甲基苯丙胺、MDA(3,4-亚甲基二氧基苯丙胺)、MDMA(3,4-亚甲基二氧基甲基苯丙胺)、MDEA(N-乙基-3,4-亚甲基二氧基苯丙胺))、PMMA(对甲氧基甲基苯丙胺)、N-异丙基苄胺、麻黄碱、司来吉兰等苯丙胺类及其相关物质的9种标准品(浓度为1.0毫克每毫升);甲醇、乙醚、乙腈、正己烷、乙酸乙酯等均为色谱纯,;HCl、冰乙酸、硼酸钠、无水MgSO4;C18(十八烷基硅烷)填料、PSA(乙二胺-N-丙基硅烷)填料、GCB(石墨化炭黑)填料、Florisil(弗罗里硅土)填料。SorvallST16R高速冷冻离心机;数显式多管漩涡混合器;ShimadzuProminecneUFLCXR超快速液相色谱系统,ShimadzuLCMS-8040串联四极杆质谱系统。

色谱条件:Gemini色谱柱(3乘150毫米,5微米),柱前端接在线过滤器。流动相为甲醇-缓冲液,缓冲液为20毫摩尔每升乙酸铵和0.1%甲酸的溶液;恒流:350微升每分钟;柱温:40摄氏度。进样体积:5微升。

质谱条件:电喷雾电离-正离子模式(ESI+);检测器电压:-2.22KV;脱溶剂管温度:280摄氏度;加热模块:450摄氏度;碰撞气压力:230KPa;雾化气流量:3.0升每分钟;干燥气流量:15.0升每分钟;采用多反应监测(MRM)进行定性定量;各分析物的监测离子。

标准溶液配制分别吸取一定量的各标准溶液,用甲醇逐级稀释,配置成不同浓度(20-5000纳克每毫升)的混合标准物质工作液。

提取方案的选择与优化:选取了常用的提取试剂乙腈、正己院、乙酸乙酯、甲醇、乙醚等5种有机提取试剂,在同一浓度水平添加下,加入相同体积的上述有机提取试剂。根据目标物在不同提取试剂下的响应丰度比较,发现乙腈对血液中苯丙胺类化合物的提取效率依次要高于甲醇、乙酸乙酯、乙醚、正己烷。分别选择乙腈与上述其他提取效果次之的试剂甲醇、乙醚、乙酸乙酯以7:3(V/V)的比例进行提取,并同步比较单独使用乙腈提取试剂的提取效果。实验结果表明,选择7:3(V/V)的乙腈与甲醇组合,大部分的目标物的提取效果均优于其他试剂组合。

实验中初步选择乙腈与甲醇组合为基本组合提取试剂,并同时比较了乙腈与甲醇在6:4,7:3,8:2,9:1(V/V)条件下提取的目标物回收响应情况,发现随着乙腈提取试剂的比例增加并未使得目标物响应增加,此处提取仍选择乙腈:甲醇组合比例为7:3(V/V)的复合试剂进行提取。

此处选取合适的类分析保护试剂以提高提取效率,加入浓度为0.1%甲酸作为类分析保护试剂。由于提取试剂的加入无水MgSO4,会发生血液凝块,实验中发现加入3-4颗研磨珠,可有效防止提取过程中血液凝块,增加提取试剂与反应样本中的接触面积,增加提取率。

精密度。取阴性血液基质,配制3个不同浓度的标准添加样本,在同一天每个浓度配制6个样本,确定方法日内检测的精密度;连续5天,分别配制这2个浓度标准添加样本,确定方法的日间检测精密度。

收集4份来自本地公安的4份涉毒嫌疑人血液样本,分别参照司法鉴定标准和本实验建立的方法进行检测,发现有3份血液样本用2种方法均检出苯丙胺、甲基苯丙胺阳性,另有1份样本使用2种方法检测均显示阴性。取3份阳性血液样本分别使用司法鉴定标准方法(内标法,其中内标物分别为Amphetamine-D5,Methamphetamine-D5)和本实验方法进行苯丙胺和甲基苯丙胺定量分析。3个临床样本使用本实验方法的准确率为71.5%-99.1%。

在传统的QuEChERS方法上进行改良创新,建立了改良的微型QuEChERS前处理方法和UPLC-MS/MS技术相结合,对血液中苯丙胺类9种物质进行定性定量的分析检测方法。该方法所耗样本量少,可有效减少血液样本中的基质干扰,可对血液中苯丙胺类及其相关9种药物进行高灵敏度和高选择性的分析,分析时间短、操作简便,在10min内可完成1个样品多成分的定性定量分析,能够满足实际检测需要,可应用于临床中的法医毒物分析。微型QuEChERS方法还可应用于其他复杂基质如尿液、唾液等其他生物建材的法医毒物分析中,为药物滥用防治和相关检测提供一定的技术支撑。文摘自分析试验室2020